顯微鏡類型、部件和術(shù)語
1665 年,羅伯特·胡克(Robert Hooke)通過將兩組透鏡放在一起以增加放大倍率來觀察第一個(gè)細(xì)胞。那是顯微鏡發(fā)展和發(fā)現(xiàn)的開始?,F(xiàn)在它們用于查看血液樣本、組織樣本和體液。醫(yī)療專業(yè)人員使用它們來診斷感染和食源性疾病。植物學(xué)家使用它們進(jìn)行植物鑒定,實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員使用它們來區(qū)分細(xì)胞系,甚至診斷癌癥。
許多不同的生物體可以用不同類型的顯微鏡觀察。引起許多感染的細(xì)菌的大小范圍從 0.1m 到 5m 或更大。這些可以用普通的光學(xué)顯微鏡觀察。真菌比細(xì)菌大,它們的單細(xì)胞階段,稱為酵母,可以用光學(xué)顯微鏡觀察。寄生蟲是從活的宿主中獲取營養(yǎng)的生物。使用光學(xué)顯微鏡可以檢測到許多寄生蟲卵。病毒是已知最小的有機(jī)體,沒有宿主就無法生存。它們的大小通常小于 1m。病毒只能用電子顯微鏡才能看到。
有哪些不同類型的顯微鏡
復(fù)合顯微鏡有兩組透鏡(物鏡和目鏡),它們使用可見光作為照明源。
暗場顯微鏡有一個(gè)裝置可以散射來自照明器的光,使樣品在黑色背景下呈現(xiàn)白色。
電子顯微鏡使用電子流而不是光來產(chǎn)生圖像。它們?cè)鰪?qiáng)了病毒、核糖體、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)甚至小分子的圖像。
熒光顯微鏡使用紫外光源照亮?xí)l(fā)出熒光的樣本。通常將熒光染料或抗體添加到正在查看的樣本中。
相差顯微鏡 允許使用特殊的聚光鏡檢查細(xì)胞內(nèi)部的結(jié)構(gòu)。它們利用不同的折射率并允許檢查活的生物體,因?yàn)闊o需對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色即可很好地區(qū)分部分。最終的圖像是由明暗組合產(chǎn)生的圖像。
顯微鏡術(shù)語
標(biāo)準(zhǔn)顯微鏡觀察區(qū)域的消色差描述。使用消色差顯微鏡,觀察區(qū)域的邊緣是彎曲的。這條曲線改變了對(duì)圓形觀察區(qū)域邊緣的標(biāo)本的感知,使它們看起來更圓、更長。這類似于在放大鏡邊緣感知的物體。
平場消色差顯微鏡觀察區(qū)域的描述,其中更昂貴的透鏡系統(tǒng)補(bǔ)償了觀察區(qū)域邊緣的失真;可以觀察到整個(gè)可視區(qū)域的真實(shí)再現(xiàn)。桿式顯微鏡聚焦調(diào)節(jié)旋鈕將整個(gè)裝置頂部移動(dòng)到桿上而不是手臂上的顯微鏡。這種類型比傳統(tǒng)的臂式顯微鏡稍不堅(jiān)固。
折射率光通過物質(zhì)的相對(duì)速度。
分辨率或分辨力用放大儀器區(qū)分精細(xì)細(xì)節(jié)的能力。也稱為區(qū)分相距指定距離的兩點(diǎn)的能力。
樣品的總放大倍率,由目鏡放大倍數(shù)乘以物鏡放大倍數(shù)確定。
顯微鏡零件
顯微鏡背面的手臂區(qū)域,用于支撐目鏡和物鏡。用于提起和搬運(yùn)它的把手的一部分。
Base范圍的底部。通常容納光源,如果有的話。底座的延伸后部也可用作手柄,用于抬起和攜帶顯微鏡。
粗調(diào)焦旋鈕用于調(diào)整物鏡位置。這應(yīng)該在繼續(xù)確保目標(biāo)不會(huì)撞到幻燈片的同時(shí)進(jìn)行調(diào)整。一旦通過目鏡看到物體,就應(yīng)該停止它。旋鈕的任何進(jìn)一步調(diào)整都可能損壞物鏡中的滑塊或鏡頭,更換起來非常昂貴。精細(xì)調(diào)焦旋鈕用于在使用粗調(diào)調(diào)焦旋鈕瞄準(zhǔn)樣品后使樣品完美對(duì)焦。非常緩慢地調(diào)整以防止物鏡和樣品之間的接觸。
照明器顯微鏡的光源。
物鏡或數(shù)值孔徑復(fù)合顯微鏡的這一部分是最靠近樣品的鏡頭。
目鏡 在復(fù)合光學(xué)顯微鏡中,這是最靠近觀察者的鏡頭。
油浸透鏡這是一個(gè) 100 倍的物鏡。鏡頭很小,以實(shí)現(xiàn)高倍率和高分辨率。由于其體積小,因此盡可能多地通過鏡頭獲得光線非常重要。通過將鏡片浸入油中,可以消除光的折射(彎曲),因?yàn)椴AШ陀偷恼凵渎蚀笾孪嗤R赃@種方式,光線被最大化并給出最清晰的圖像。如果使用沒有油的油浸鏡頭,圖像會(huì)變得模糊,分辨率很差。
關(guān)于顯微鏡的常見問題
問:為什么我的 100 倍物鏡必須使用浸油?
A.為了獲得高倍率,必須將鏡頭切得極小。因此,盡可能多的光線通過鏡頭很重要,這樣觀察者才能看到有問題的物體。油改變了光的折射,所以光穿過透鏡而不是彎曲和向各個(gè)方向散射。
問:哪個(gè)更好:平面消色差顯微鏡或消色差顯微鏡?
A.兩種類型的顯微鏡都非常適合在觀察區(qū)域的中心觀察標(biāo)本。但是,如果您必須在視野中的任何位置計(jì)數(shù)細(xì)菌或區(qū)分細(xì)菌的形狀,平面消色差顯微鏡更適合。這些顯微鏡有一個(gè)透鏡系統(tǒng),可以補(bǔ)償觀察區(qū)域邊緣的失真,使標(biāo)本看起來非常清晰。
問:我如何知道我正在查看的內(nèi)容的總放大倍數(shù)?
A.首先要確定的是目鏡的放大倍數(shù);那是離觀察者最近的鏡頭。這個(gè)鏡頭的放大倍數(shù)會(huì)被蝕刻到金屬上。目鏡的標(biāo)準(zhǔn)放大倍率為 10 倍。然后你必須找到物鏡的放大倍率。那是最靠近樣品的鏡頭。這個(gè)數(shù)字也將刻在物鏡上。然后將這兩個(gè)放大倍數(shù)相乘以獲得總放大倍數(shù)。例如,如果您有一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的 10 倍目鏡并使用 40 倍物鏡,那么您的總放大倍率將是 400 倍。
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